Desarrollo de un microsistema fabricado en su-8 para electroforesis de ADN y proteínas mediante geles de poliacrilamida, para su uso en genotipado

Abstract

Esta tesis doctoral desarrolla el diseño, la fabricación y la caracterización de un dispositivo miniaturizado para la electroforesis de moléculas de ADN y proteínas, utilizando una fotorresina llamada SU-8 como material estructural. En primer lugar, se ha desarrollado una nueva tecnología de fabricación que consiste en sucesivos pasos de fotolitografía y pegado de películas de SU-8. Esta tecnología ofrece una herramienta excelente para la fabricación de laboratorios en un chip, tanto para el prototipado rápido como para la fabricación a gran escala. Tras optimizar esta tecnología de fabricación, se ha diseñado y fabricado el dispositivo miniaturizado para electroforesis, con los microcanales de SU-8 y electrodos de platino integrados. Además, se ha encapsulado el dispositivo mediante un método que no necesita conexionados por microhilos metálicos y permikte la sustituicón de dispositivos utilizados por unos nuevos de una forma sencilla y cómoda. En este dispositivo se han llevado a cabo separaciones de moléculas de ADN y proteínas mediante dos modalidades diferentes de electroforesis: electroforesis capilar en gel y electroforesis capilar en solución. Se ha encapsulado el dispositivo mediante un método que no necesita conexionados por michorilos metálicos y permite la sustitución de dispositivos utilizados por unos nuevos de una forma sencilla y cómoda. En este dispositivo se han llevado a cabo separaciones de moléculas de ADN y proteínas mediante dos modalidades diferentes de electroforesis: electroforesis capilar en gel y electroforesis capilar en solución. Se ha llevado a cabo una caracterización exhaustiva de estas dos modalidades. Para la caracterización de la exhaustiva de estas dos modalidades. Para la caracterización de la electroforesis capilar en gel, en primer lugar, se ha optimizado la polimerización de la poliacrilamida dentro de los microcanales. Se han utilizado poliacrilamidas con cuatro concentraciones difer