Novel proteomic and lipidomic biomarkers for limbal epithelial stem cell identification and corneal transplant monitoring

Resumen

El objeto de esta tesis doctoral ha sido la caracterización proteómica y lipidómica de cinco poblaciones celulares de la córnea humana para la identificación de nuevos biomarcadores de cada tipo celular. Además, se han empleado las poblaciones celulares caracterizadas para el desarrollo de un sistema de monitorización de la respuesta inmune humoral frente a injerto generada por trasplantes de córnea. Para esto, se han extraído cinco tipos celulares de corneas humanas y sus extractos se han analizados mediante ensayos de proteómica. En paralelo, se han estudiado extractos celulares, cortes de córnea y células corneales inmovilizadas sobre portas de vidrio utilizando distintos métodos lipidómicos. Así mismo, se han empleado sueros de pacientes que hayan recibido al menos un trasplante corneal para detectar anticuerpos reactivos frente al injerto, utilizando las células corneales previamente caracterizadas como dianas antigénicas. Los resultados obtenidos demuestran que cada tipo celular tiene un perfil proteómico y lipidómico único que permite diferenciarlos entre sí. Además, se ha propuesto un biomarcador proteico para la identificación de células epiteliales progenitoras del limbo esclerocorneal, relacionadas con la regeneración corneal, y que podría ser de gran interés para mejorar la terapia celular en casos de la deficiencia en células madre limbares. En cuanto al estudio lipidómico, se ha visto que los tipos de ácidos grasos son diferentes en zonas concretas de la córnea, dando lugar a una distribución específica que se podría relacionar con la funcionalidad de cada región. Por otro lado, se ha conseguido realizar una prueba de concepto del sistema de monitorización de la respuesta inmune humoral, en la que se han identificado anticuerpos reactivos en sueros de pacientes que habían recibido al menos un trasplante corneal. // El objeto de esta tesis doctoral ha sido la caracterización proteómica y lipidómica de cinco poblaciones celulares de la córnea humana para la identificación de nuevos biomarcadores de cada tipo celular. Además, se han empleado las poblaciones celulares caracterizadas para el desarrollo de un sistema de monitorización de la respuesta inmune humoral frente a injerto generada por trasplantes de córnea. Para esto, se han extraído cinco tipos celulares de corneas humanas y sus extractos se han analizados mediante ensayos de proteómica. En paralelo, se han estudiado extractos celulares, cortes de córnea y células corneales inmovilizadas sobre portas de vidrio utilizando distintos métodos lipidómicos. Así mismo, se han empleado sueros de pacientes que hayan recibido al menos un trasplante corneal para detectar anticuerpos reactivos frente al injerto, utilizando las células corneales previamente caracterizadas como dianas antigénicas. Los resultados obtenidos demuestran que cada tipo celular tiene un perfil proteómico y lipidómico único que permite diferenciarlos entre sí. Además, se ha propuesto un biomarcador proteico para la identificación de células epiteliales progenitoras del limbo esclerocorneal, relacionadas con la regeneración corneal, y que podría ser de gran interés para mejorar la terapia celular en casos de la deficiencia en células madre limbares. En cuanto al estudio lipidómico, se ha visto que los tipos de ácidos grasos son diferentes en zonas concretas de la córnea, dando lugar a una distribución específica que se podría relacionar con la funcionalidad de cada región. Por otro lado, se ha conseguido realizar una prueba de concepto del sistema de monitorización de la respuesta inmune humoral, en la que se han identificado anticuerpos reactivos en sueros de pacientes que habían recibido al menos un trasplante corneal.