Caracterización funcional de la proteína 6K de alfavirus el virus sindbis como vector de expresión

Resumen

Las proteínas 6K del SFV y del SV son capaces de inducir cambios de permeabilidad a higromicina B cuando se sintetizan, tanto en bacterias como en células de mamífero. Un mutante de deleción en 6K del SV presenta defectos en el procesamiento de la poliproteína precursora de las glicoproteínas virales. Este defecto va acompañado de cambios en la maduración y transporte a membrana celular de las glicoproteínas virales que le hacen inviable. Psudorevertientes viables de este mutante presentan un procesamiento del precursor similar al wt, pero aún difieren de éste por su fenotipo de placa pequeña. La complementación de los pseudorevertientes con una 6K genuina expresada en trans no revierte el fenotipo de placa pequeña. Los replicones diseñados, basados en el genoma del SV que expresan "C + proteína heteróloga" permiten una síntesis abundante de proteínas recombinantes en células de mamífero. Estos replicones permiten un análisis rápido y eficaz de los cambios de permeabilidad de las proteínas heterólogas. Se ha clonado el genoma completo del virus de la polio dentro de un replicón del SV. El estudio de mutantes no viables del virus de la polio se ve facilitado por el empleo de este replicón.