Identification of deubiquitinating enzyme genes relevant for the regulation of retina-specific genes

Resumen

Las modificaciones post-traduccionales de proteínas son mecanismos de regulación que las células utilizan en respuestas a intra y extracelulares. En el caso de las modificaciones covalentes con proteínas, como lo es la ubiquitinación, estos mecanismos de regulación son reversibles y dinámicos. La ubiquitinación se hace reversible por la acción de las enzimas deubiquitinantes (DUBs), encargados de hidrolizar el enlace entre la ubiquitina y sus proteínas sustrato. Las DUBs juegan importantes roles en enfermedades y procesos celulares, no obstante, todavía hay poca información sobre su implicación y regulación de tejidos específicos, como la retina. La retina órgano de la visión responsable de capturar estímulos lumínicos, convertirlos en estímulos electroquímicos y finalmente mandar esta información hacia el córtex visual. Existen dos tipos de fotoreceptores, los conos y los bastones, que difieren funcional y estructuralmente, pero que provienen de una misma célula precursora. Se ha descrito que esta estricta diferenciación se lleva a cabo gracias a la acción combinada de factores de transcripción específicos junto a las modificaiones post-traduccionales, como lo és la molecula ubiquitin-like, SUMO. El presente trabajo pretende analizar la acción de los enzimas deubiquitinantes en el desarrollo de la retina y los fotoreceptores. Para ello, se ha llevado a cabo una primera descripción de los niveles y el patrón de expresión de estos enzimas en la retina; así como un anàlisis transcriptómico en diferentes estadíos de desarrollo retinal murino y humano. Además, se ha realizado un estudio de su conservación evolutiva y su implicación en fenotipos neuronales y de retina. Asimismo, se ha puesto a punto un sistema celular que replica condiciones fisiológicas similares a las retinales y se ha realizado un análisis de silenciamiento de los genes que codifican para las DUBs utilizando shRNA, siRNA y Gapmers. Finalmente, se ha realizado un análisis de las posibles modificaciones post-traduccionales en el factor de transcripción retinal CRX.