Characterization of the Isoforms of the Multiple Sclerosis Risk Protein, IL-22 Binding Protein (IL-22BP)

Resumen

The human IL22RA2 gene co-produces three protein isoforms in dendritic cells (IL-22 binding protein isoform-1 [IL-22BPi1], -2 [IL-22BPi2], and -3 [IL-22BPi3]). Two of these, namely, IL-22BPi2 and IL-22BPi3, are capable of neutralizing the biological activity of IL-22. The function of IL-22BPi1, which differs from IL-22BPi2 through an in-frame, 32-amino-acid insertion provided by an alternatively spliced exon, remains unknown.This thesis focuses on the biochemical characterization of the three isoforms (in silico and in vitro), as well as the potential pharmacological targeting thereof. Additionally, it addresses the functionality of the non-synonymous single nucleotide polymorphism (SNP), rs28385692, which is located in IL22RA2 and has been found to be associated with multiple sclerosis (MS).El gen humano IL22RA2 coproduce tres isoformas en las células dendríticas (la isoforma-1 de la proteína de unión a la IL-22 [IL-22BPi1], la -2 [IL-22BPi2] y la -3 [IL-22BPi3]). Dos de ellas, la IL-22BPi2 y la IL-22BPi3, son capaces de neutralizar la actividad biológica de la IL-22. La función de la IL-22BPi1, que difiere de la IL-22BPi2 por una inserción de 32 aminoácidos mediante splicing alternativo, sigue siendo desconocida. El objetivo general de esta tesis es comprender la función y el destino de la IL-22BP mediante la caracterización bioquímica de sus isoformas. Los obteivos específicos son: estudiar la expresión de los transcritos de IL22RA2 y relacionarlos con la secreción de sus isoformas mediante su caracterización bioquímica, así como identificar los factores clave implicados en su plegamiento y secreción e investigar su secreción y función dentro de la célula; evaluar si las chaperonas identificadas pudieran ser utilizadas como posibles dianas terapéuticas que tuvieran efectos diferenciales en la secreción de las isoformas de IL-22BP; y determinar si la variante de riesgo de la EM, rs28385692, tiene efectos funcionales sobre las isoformas de la IL-22BP y en qué medida.