Identificación y caracterización bidimensional de antígenos de cándida albicans de interés diagnóstico

Abstract

Las infecciones por Candida albicans se han incrementado dramaticamente durante las dos ultimas decadas. Desde un punto de vista diagnostico, la candidiasis invasiva es la que presenta más dificultades debido a la ausencia deuna sintomatologia clínica especifica, a la imposibilidad de obtener en muchos casos muestras histológicas para la demostración de la presencia del hongo en el tejido infectado y a la ocurrencia de falsos negativos en los hemocultivos. Por todo ello, el diagnostico serológico, basado bien en el estudio de la respuesta de anticuerpos del paciente, bien en la deteccion de antigenos circulantes y metabolitos fungicos, se ha visto impulsado en los ultimos años en un intento de identificar marcadores serologicos de la candidiasis invasiva. Sin embargo, esta identificacion resulta complicada debido a la complejidad y variabilidad de la composición antigenica de Candida albicans. Asi, la electroforesis bidimensional (2-DE) basada en el fraccionamiento acoplado a la carga y el peso molecular de los proteinas ha demostrado ser una herramienta muy util en el analisis de mezclas complejas de proteinas de Candida. La combinación de esta tecnica de separacion electroforetica con la inmunodetección mediante Western blot y revelado con quimioluminiscencia frente a distintos antisueros animales, humanos, anticuerpos monoclonales y lectinas, ha permitido llevar a cabo el objetivo principal del presente trabajo, la identificacion y caracterizacion de proteinas de Candida albicans mediante 2-DE en busca de posibles marcadores antigenicos de la candidiasis invasiva. De esta manera, de los aproximadamente 700 péptidos resueltos en los mapas proteicos en dos dimensiones, se han considerado antigenos de interes diagnostico por presentar una marcada respuesta de anticuerpos en los pacientes con candidiasis invasiva pero ninguna o muy poca en las personas sanas, catorce antigenos de naturaleza manoproteica y cuyos epitopos de reconoci