Caracterización de antígenos de excreción-secreción de protoescolex de echinococcus granulosus y su aplicación al inmunodiagnóstico de la hidatiodosis/equinococosis

  1. CARMENA JIMENEZ, DAVID
Dirigida por:
  1. Jorge Antonio Guisantes del Barco Director/a
  2. Jorge Martínez Quesada Codirector/a

Universidad de defensa: Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea

Fecha de defensa: 11 de septiembre de 2001

Tribunal:
  1. Ramón Cisterna Cáncer Presidente/a
  2. Guillermo Quindós Andrés Secretario/a
  3. Francisco A. Rojo Vázquez Vocal
  4. Santiago Hernández Rodríguez Vocal
  5. Ignacio Navarrete López-Cózar Vocal
Departamento:
  1. Inmunología, Microbiología y Parasitología

Tipo: Tesis

Teseo: 84005 DIALNET

Resumen

El objetivo de esta Tesis doctoral ha sido la caracterización de los antigenos de posible relevancia serodiagnóstica presentes en los productos de excrecion-secreción generados por los protoescolex de Echinococcus granulosus como consecuencia de su actividad metabolica. Para ello se han empleado tecnicas de caracterizacion bioquimica (determinación de proteinas, electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de SDS y determinacion de actividades enzimáticas) e inmunoquímicas (inmunotransferencia, ELISA, ELISA-inhibición e inmunotransferencia-inhibición). Para la obtención del antígeno de excreción secreción los protoescólex del parasito fueron mantenidos en un medio desarrollado en nuestro laboratorio. Se estudiaron tanto la supervivencia de los mismos como su producción de proteinas a lo largo de todo el periodo de mantenimiento. En los estudios de caracterización inmunoquímica el extracto antigenico de excreción-secreción fue comparado con los extractos antigenicos somatico de protoescolex y de liquido hidatídico, ambos tambien de E.granulosus. Los resultados obtenidos más relevantes se enumeran a continuación: 1. El medio desarrollado en nuestro laboratorio para el mantenimiento de protoescoléx de E.granulosus permite la obtención de antígenos de excreción-secreción de elevada pureza. 2. La fase óptima para la consecución de estos antígenos es la correspondientes a las pirmeras 50 horas de mantenimiento delos protoescolex. 3. La composición proteica del antigeno de excrecion-secreción no muestra diferencias ni entre protoescolex de procedencia hepatica ni entre protoescolex tratados/no tratados con pepsina. 4. El antígeno de excrecion-secreción posee enzimas con actividad fosfatasa, lipasa y glucosidasa, pero no se ha detectado actividad proteasa. 5. Para el serodiagnóstico de la hidatidosis humana mediante ELISA el antígeno somatico es el extracto que proporciona una mayor sensibi