Estudio del papel de la colesterol éster hidrolasa microsomal y de la disponibilidad de colesterol en la secreción biliar y de vldl en hepatocitos de rata

Resumen

El hígado juega un papel fundamental en la regulación del metabolismo de colesterol. Dentro de los procesos que participan en el complejo mecanismo homeostático, son de crucial importancia la esterificación del colesterol, la hidrólisis de sus ésteres y el empaquetamiento de ambos con otros lípidos y proteínas en forma de lipoproteínas VLDL como medio de transporte para acceder a otros lugares del organismo a través de la circulación. Entre las enzimas que participan en el metabolismo hepático del colesterol, la colesterol éster hidrolasa microsomal (CEHm) es una de las enzimas menos conocida y estudiada. Por otro lado, no se sabe con precisión cual de los componentes de las VLDL es el que controla su producción y secreción. Así, en este contexto, los objetivos del presente trabajo son averiguar el papel de la CEHm en el mantenimiento de la homeostasis del colesterol hepático y si la secreción hepática de VLDL responde a cambios rápidos en la disponibilidad celular de colesterol libre y esterificado, ambos componentes de las VLDL y potenciales protectores de la apoB. Para lograr estos objetivos, se estudia el efecto de compuestos con acción conocida sobre la disponibilidad de colesterol celular endógeno, tales como la mevalonolactona, el compuesto Sandoz 50-035 y la esfingomielinasa neutra, tras la incubación de suspensiones de hepatocitos de rata durante 2 o 4 horas. Se determina la actividad específica de las enzimas CEHm, ACAT y colesterol-7alfa-hidroxilasa; el contenido de colesterol libre y esterificado en microsomas y en citosol; la incorporación de oleato marcado en ésteres de colesterol; la composición lipídica de la secreción biliar; e número de VLDL secretadas y su composición en lípidos y apoB. De los resultados obtenidos en cada uno de los casos, se deducen las siguientes conclusiones: 1. En hepatocitos de rata en suspensión, la CEHm no parece tener un papel en el repa