Señalización celular acoplada al receptor p2x7 en glándula submandibular de rata

Abstract

La secreción salivar en la glándula submandibular se produce en dos etapas: las células acinares secretan una saliva primaria isotónica fluida, rica en sodio y potasio. La composición de esta saliva es modificada a su paso a través de los conductos tapizados de células ductales, que reabsorben sodio y cloro, y secretan potasio y bicarbonato, así como diversas proteinas y mucinas para dar la saliva final que llega a la cavidad bucal, que es hipotónica y más viscosa. La secreción salivar está regulada neuronalmente por vía simpática y parasimpática y depende de la acción de diversos neurotransmisores que actúan a través de diferentes vías de señalización celular, como la fosfolipasa C, adenilato ciclasa, canales de calcio, etc. El ATP se almacena y secreta conjuntamente con otros neurotransmisores y ejerce sus efectos a través de receptores purinérgicos. Los receptores purinérgicos P2 se dividen en dos familias, los P2Y, acoplados a la fosfolipasa C y/o adenilato ciclasa, y los P2X, que son conductos inespecíficos de cationes. El trabajo presentado en esta Tesis ha centrado su atención en el estudio de las vías de señalización celular y la caracterización molecular del receptor P2X7, un tipo especial de receptor P2X, capaz de formar poros que permiten el paso de moléculas de hasta 900 Da y que está presente tanto en ductos como en acinos, como se ha demostrado por RT-PCR y transferencia Northern. Se ha caracterizado en células acinares la modulación a través de este receptor de la respuesta a otros neurotransmisores, carbacol y substancia P, que activan a la fosfolipasa C. Además, se ha diseñado un método de carga ácida que permite un nuevo enfoque del estudio del receptor en ausencia de cationes divalentes en el medio extracelular. Se ha puesto a punto una técnica para la obtención de suspensiones frescas de células ductales y se ha utilizado para el estudio de los mecanismos de señalizac