Caracterización de los complejos nucleoplasminahistona y su papel en el remodelado de la cromatina

Abstract

La nucleoplasmina (NP o NPM2) es una chaperona de histonas presente en losoocitos (oNP) y huevos (eNP) de Xenopus laevis. Esta proteína se hiperfosforila durante lamaduración del oocito a huevo, lo cual es esencial para su actividad. En el oocito, la NPune y almacena los dímeros H2A/H2B y, tras la fecundación, media el ensamblaje denucleosomas en la cromatina espermática al retirar las proteínas básicas específicas delespermatozoide (SSBPs) y añadir los dímeros H2A/H2B. Además, la NP está implicada enel remodelado de la cromatina al inicio de la embriogénesis. Al igual que otras chaperonasde histonas, la NP es capaz de unir diferentes tipos de ligandos básicos como las histonas¿linker¿ (H1 y H5), SSBPs y los dímeros H2A/H2B. En este trabajo hemos visto que invitro NP también interacciona con los dímeros y tetrámeros H3/H4 y con el octámero dehistonas. Ensayos de inmunoprecipitación en extractos de oocito y huevo demuestran laexistencia de complejos entre NP y H3/H4. A relaciones molares NP:H3/H4subestequiométricas, la chaperona une dímeros H3/H4. Cuando el complejo se satura(NP:H3/H4 1:2), se obtiene un complejo similar al formado con el octámero de histonas,en el que dos pentámeros de NP unen y estabilizan por su cara distal dos tetrámerosH3/H4 o un octámero de histonas, a diferencia de los complejos NP:H2A/H2B quecontienen hasta cinco dímeros de histona por pentámero de NP. La hiperfosforilación dela chaperona incrementa su afinidad por los distintos tipos de histonas y ligeras diferenciasde afinidad entre ellos (Kdapp H1¿H5menorH2A/H2BmenorH3/H4) permiten a la chaperona llevara cabo su actividad remodeladora de cromatina.