Receptores a2b de adenosinacaracterización en células parietales de mucosa gástrica de conejo

Resumen

La adenosina es un nucleósido endógeno que modula muchos procesos fisiológicos. Sus acciones están mediadas por interacciones con receptores de membrana celular acoplados a proteínas G, de los cuales se han clonado cuatro subtipos: A1, A2A, A2B y A3. El receptor A2B es el menos estudiado, quizá por su baja afinidad por la adenosina y la falta de pruebas farmacológicas específicas. En los últimos años ha aumentado considerablemente el interés por este subtipo de receptor al comprobarse que está implicado en importantes funciones, como la secreción gástrica de ácido. En esta Tesis se han utilizado células parietales de mucosa gástrica de conejo y membranas aisladas para caracterizar el receptor A2B adenosina. Se ha observado que la ocupación del receptor A2B de adenosina por sus agonistas NECA y 2-CADO en las células parietales aisladas de la mucosa gástrica de conejo estimula las secreción de ácido mediante la activación de la adenilato ciclasa, pero no produce modificaciones de los niveles de Ca2+ citosólico. Los experimentos de microscopía confocal y citometría de flujo indican que el receptor A2B de adenosina y la adenosina desaminasa colocalizan parcialmente en las membranas de estas células, especialmente en los lugares de contacto de unas células con otras. Mediante Western blotting y extracción selectiva de proteínas de membrana se demuestra que la GRP94 está también presente como proteína no integral en la membrana de la célula parietal. Los experimentos de unión a radiolingados indican que existen dos lugares de unión a [3H]-NECA en las membranas de estas células: el receptor A2B de adenosina y la GRP94. El radicicol inhibe la unión de [3H]-NECA a las membranas son una Ki 19 nM. En conclusión, el receptor A2B de adenosina puede tener un papel fisiológico en la estimulación de la secreción gástrica de ácido quizá modulado por la adenosina desaminasa y la GRP94.