Nuevas metodologías analíticas basadas en lc-itms para la determinación de diuréticos y metabolitos en fluidos biológicos

  1. AKESOLO MUGURUZA, URTZI
Supervised by:
  1. Ramón José Barrio Díez-Caballero Director
  2. Rosa Maria Alonso Rojas Director

Defence university: Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea

Fecha de defensa: 13 May 2009

Committee:
  1. Joan Sallés Alvira Secretary
  2. María Aranzazu Goicolea Altuna Committee member
  3. Antonio Pla Martínez Committee member
  4. Luis María Polo Díez Committee member
  5. Rosa Ventura Alemany Committee member
Department:
  1. Química Analítica

Type: Thesis

Teseo: 233903 DIALNET

Abstract

Los diuréticos abarcan una variada gama de compuestos ampliamente empleados en la lucha contra la hipertensión y en prácticas de dopaje en deporte. Entre ellos, los diuréticos del asa o alta eficacia (representados por bumetanida, furosemida, piretanida y torasemida) y los diuréticos tiazídicos (con su máximo exponente hidroclorotiazida) son ampliamente prescritos y empleados en terapia simple o terapia combinada. El presente trabajo desarrolla un método de determinación de diuréticos en matrices biológicas (sangre y orina) mediante cromatografía líquida con detección por espectrometría de masas con analizador de trampa de iones (LC-ITMS). Para ello, se llevó a cabo un estudio exhaustivo de los parámetros de la separación cromatográfica, mientras que los parámetros operacionales propios del ITMS y los correspondientes a los compuestos a estudio fueron estudiados mediante infusión directa. De este modo, se desarrolló un método de determinación MS/MS con que cuantificar los diuréticos a estudio en los bajos niveles de concentración requeridos. A continuación se aplicó el método desarrollado a las matrices biológicas sangre y orina. Se estudió la posible existencia de efecto matriz y los tratamientos previos de muestra más adecuados. Las sistemáticas desarrolladas (dilución y filtrado de orina y precipitación de proteínas, centrifugado y filtrado de plasma) resultaron extremadamente sencillas y fáciles aplicar. La evaluación analítica del método fue satisfactoria en ambas matrices La metodología desarrollada se aplicó con éxito a la determinación de los compuestos a estudio en muestras reales de voluntarios sanos que ingirieron dosis terapéuticas. Los bajos niveles de cuantificación alcanzados permitieron la determinación de todos los compuestos a estudio y varios metabolitos de torasemida (único compuestos que se metabolizaba extensivamente) y dejan la puerta abierta a futuros estudios clínicos de farmacocinética y farmacodinámica.