Estudio de eficacia y toxicidad de nuevos farmacos en un modelo experimental refinado de vitreorretinopatia proliferativa

Resumen

MATERIAL Y METODOS: EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL VAMOS A REALIZAR UN ESTUDIO IN VITRO SOBRE EL EPR HUMANO VALORANDO DOS PARAMETROS: 1) INHIBICION DE CRECIMIENTO: EXPUSIMOS LOS CULTIVOS DE BAJA DENSIDAD (3.000 CELULAS) A CONCENTRACIONES CRECIENTES DE MITOMICINA-C Y 5-FLUORACILO. 2) CITOTOXICIDAD: SE REALIZO UNA EXPOSICION UNICA A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE LOS FARMACOS SOBRE UN CULTIVO CONFLUENTE DE 10.000 CELULAS. REALIZAMOS TAMBIEN UN ESTUDIO DE EFICACIA IN VIVO: UN TOTAL DE 60 CONEJOS PIGMENTADOS, DE PESO ENTRE 1.5 Y 2.5 KG SIGUIERON EL MODELO REFINADO DE VPR SEGUN LA TECNICA DE COMPRESION VITREA MEDIADA POR GAS DESCRITA POR CHANDLER. LOS CONEJOS FUERON RANDOMIZADOS EN 4 GRUPOS, SE INYECTARON A NIVEL INTRAVITREO EN CADA GRUPO, EN CONDICIONES ESTERILES LAS SIGUIENTES SOLUCIONES: GRUPO CONTROL (N=14): 0.1 ML DE PBS Y GRUPO TRATADO CON MITOMICINA-C (N=14): INYECTAMOS 0.1 ML DE MITOMICINA-C A UNA CONCENTRACION 0.02 MG/ML. GRUPO CONTROL LIPOSOMAS (N=16): INYECTAMOS 0.1 ML. DE LIPOSOMAS VACIOS QUE CONTENIAN SOLAMENTE SUCROSA. GRUPO TRATADO LIPOSOMAS 5-FUR (N=16): INYECTAMOS 0.1 ML DE LIPOSOMAS MULTIVESICULARES CONTENIENDO 5-FLUORORIDINA A UNA CONCENTRACION DE 0.1 MG/0.1 ML. SE CLASIFICABAN LOS OJOS EN ESTADIOS DE VPR EN CADA PUNTO DE LA OBSERVACION SIGUIENDO LOS ESTADIOS DE HIDA VALORANDO EL EXITO O FRACASO DE LA MITOMICINA-C Y DE LOS LIPOSOMAS DE 5-FUR EN FUNCION DE LA AUSENCIA DEL DRT (ESTADIOS 0-4) O PRESENCIA DEL MISMO (ESTADIOS 5-7). SE VALORO EN CONEJOS TAMBIEN PARA AMBOS FARMACOS LA TOXICIDAD RETINIANA (N=18) A MICROSCOPIA OPTICA Y ELECTRONICA, ASI COMO LA TOXICIDAD ENDOTELIAL (N=24) DE LA DOSIS INTRAVITREA UTILIZADA. SE CORRELACIONARON LAS MEMBRANAS EXPERIMENTALES CON LAS HUMANAS. RESULTADOS: 1-A IDENTICA CONCENTRACION, LA MITOMICINA-C ES MAS EFICAZ QUE EL 5-FLUORACILO EN SU CAPACIDAD DE INHIBIR IN VITRO EL CRECIMIENTO DE LAS CELULAS DEL EPITELIO PIGMENTARIO DE LA RETINA HUMANA. 2-LA INYECCION INTRAVITREA DE MITOMICIN