Estudio molecular de resistencia a beta-lactamicos

Resumen

En este trabajo se ha estudiado la proporción de las batalactamasas plasmídicas TEM-1, TEM-2, y ROB-1 presentes en 177 cepas de Haemophilus influenzae recogidas en el Servicio de Microbiologia del Hospital la FE de Valencia. Basamos el estudio en técnicas moleculares (PCR, FRLPs, y secuenciación de ácidos nucleicos) comparando los resultados obtenidos con los de las técnicas microbiológicas clásicas (prueba del nitrocefin, y estudio de CMI para los antibióticos ampicilina, coamoxiclav, cefaclor y loracarbe). Durante el estudio apareció un gen mutante derivado de blaTEM-1UN 37,2% portaba alguno de los siguientes genes de resistencia : blaTEM-1(41,5%), blaTEM-1(mutante), (46,2%) y blaTEM-2(12,3%).Un 24,6% de estas cepas portadoras de gen blaTEM dieron negativo a la prueba del nitrocefin, correspondiento el 62,5% a (TEM-1/TEM-2) Y EL 37,5% al mutado. Esto indica que las cepas con la mutación son más expresivas, y por tanto más resistentes. Para confirmar esta hipótesis se estudiaron estadísticas las CMLs de todas las cepas resistentes genotípica y/o fenotipicamente. Al comparar el mutante con TEM-1 se observa no hay diferencias significativas para la ampicilina ni para el coamoxiclav, pero si para cefaclor y loracarbef, siendo las CMIs del mutado superior que las de TEM-1. Cuando comparamos el mutante con TEM-2 no hay diferencias significativas. Con respecto a la otra beta-lactamasa ogjeto de estudio, ROB-1 hicimos un estudio paralelo. ROB-1 aparecia en el 3,9% del total de las cepas y en el 9,7% de los positivos. Al comparar con los otros grupos resistentes observamos que hay diferencias significativas para todos los antibióticos excepto para el coamoxiclav siendo las CMIs muy superiores para las cepas ROB-1 Un 8,8% de cepas fue positivo al nitrocefin no presenta ninguno de los genes de resistencia estudiados (P.C.R. negativa), esa resisntecia se debe a otro gen distinto a los estudiados.