Rutas de transporte núcleo-citoplásmicas en "Aspergillus nidulans"

Resumen

Aspergillus nidulans es un hongo ascomiceto multinucleado y que crece de forma hiperpolarizada. Como organismo eucariota presenta el material genético en el interior del núcleo, envuelto por la membrana nuclear. El poro nuclear, estructura de la memb rana nuclear, permite la libre difusión de moléculas menores a 30 kDa, pero el transporte de macromoléculas es un proceso dependiente de energía y que requiere la participación de proteínas especializadas en el transporte nuclear. Estos transportado res se unen con afinidad variable a las nucleoporinas, proteínas especializadas del poro nuclear, permitiendo así el transporte direccional del complejo transportador/carga. En esta tesis doctoral se aborda el estudio de los componentes solubles de la maquinaria de transporte nuclear. El trabajo realizado es pionero en este campo dado que es el primer análisis sistemático de los transportadores nucleares que se ha realizado en un organismo multinucleado, Aspergillus nidulans, por un mismo grupo de investigación. Se ha identificado la presencia de 17 genes que codifican para todos los transportadores nucleares previamente descritos en otros organismos de los cuales 14 pertenecen a la superfamilia de la importina-beta y 3 a la familia Ntf2. Analizamos la función de esta maquinaria de transporte mediante la generación de alelos nulos para cada gen identificado y se ha puesto de manifiesto que 6 transportadores nucleares son esenciales. En este estudio se muestra la conservación entre la s diferentes rutas de transporte y la maquinaria molecular implicada y descrita en otros eucariotas. Sólo cuatro de estas rutas son esenciales siendo Aspergillus un modelo donde estudiar la redundancia de las demás rutas de transporte. Se ha estudi ado la distribución subcelular de los transportadores nucleares mediante formas etiquetadas con la proteína fluorescente GFP. Los transportadores se han clasificado en tres grupos dependiendo de su localización: preferentemente nuclear, núcleo-citopl ásmico y preferentemente nuclear. Los elementos que coordinan el tráfico núcleo-citoplásmico se distribuyen homogéneamente en todos los núcleos de un sincitio lo que indica que son competentes para un transporte nuclear activo. Durante la mitosis se ha demostrado que modifican su localización, observando tanto dispersión como retención nuclear. La asociación de ciertos transportadores nucleares durante este ciclo celular ha puesto de manifiesto posibles funciones adicionales de los transportador