Novel biomarkers for invasive candidiasis. Selection, characterization and evaluation of Hyr1, a Candida albicans hyphally regulated cell wall protein

Abstract

ES: La candidiasis invasora es una enfermedad potencialmente mortal causada por especies del género Candida. El pronóstico de esta enfermedad está estrechamente relacionado con el diagnóstico precoz; sin embargo, el hemocultivo, el actual estándar para el diagnóstico, tiene una baja sensibilidad y tarda días en proporcionar resultados. La detección de anticuerpos contra los tubos germinales de Candida albicans (CAGTA) mediante inmunofluorescencia indirecta ha surgido como alternativa, pero esta técnica tiene limitaciones que pueden superarse identificando las dianas específicas de estos anticuerpos. Con este fin, hemos analizado una librería de expresión de ADNc de C. albicans utilizando para ello suero inmune de un modelo animal de candidiasis invasora, identificando 5 proteínas como posibles dianas: la aminopeptidasa 2 (Ape2), la subunidad gamma del coatómero (Sec21), la cistationina gamma-liasa (Cys3), la enolasa 1 (Eno1) y la proteína de la pared regulada por las hifas (Hyr1). El análisis in silico de las 5 proteínas llevó a la selección de Hyr1 para continuar con su estudio como potencial biomarcador para el diagnóstico de la candidiasis invasora; del mismo modo, también se seleccionó un fragmento de la proteína, que denominamos D22b. Durante la caracterización de esta proteína se observó que el gen quela codifica, HYR1, presenta alta variabilidad dentro de la especie C. albicans, mostrando algunos de los alelos identificados una asociación estadísticamente significativa con la localización anatómica de los aislamientos. En relación con la utilidad de Hyr1 como biomarcador, la detección de anticuerpos contra Hyr1 y su fragmento D22b, fue útil para el diagnóstico de pacientes con candidiasis invasora, no sólo las causadas por C. albicans sino también por otras especies de Candida, con valores de sensibilidad y especificidad superiores al 70% y 80% respectivamente, y en algunos casos, anticipando el diagnóstico con respecto al hemocultivo. Por último, el desarrollo de anticuerpos monoclonales contra un posible péptido antigénico de la proteína dio lugar a dos anticuerpos de cadena simple que reconocían la proteína recombinante y que en un futuro podrían ayudar a caracterizar, diagnosticar o combatir las infecciones por Candida