Estudio de mecanismos de acción de nuevos agentes antitumorales

Résumé

ESTUDIO DE MECANISMOS DE ACCIÓN DE NUEVOS AGENTES ANTITUMORALES #RESUMEN: Con el fin de conseguir terapias antitumorales menos tóxicas, el presente proyecto se centra en la investigación de nuevos compuestos antineoplásicos basados en mecanismos proapoptótieos. Los compuestos estudiados en este trabajo son derivados de carbamato, aminas centrales con cadenas alifáticas variables, piridinas y sistemas aromáticos bicíclicos como pirido[2,3-d]pirimidinas. El potencial efecto citotóxico de de estos productos fue evaluado comprobando su citotoxicidad en líneas de cáncer de mama, vejiga y colon (MD-MBA-231, T-24 y HT-29). Algunos de estos compuestos afectaron la viabilidad celular de estas líneas de manera dosis y tiempo dependiente. En los compuestos con mejor actividad se realizaron pruebas de activación de apoptosis ¿ y de activación de caspasa-3. Los mejores productos se probaron en dos líneas no tumorales (CRL-8799 y CRL-11233) para determinar la selectividad de la acción. El compuesto que demostró mejor perfil de actividad en estos ensayos fue el Bis-(4-metoxibencil)-pirido[2,3-d]pirimidina-2,4-diamina (HC-6). Se encontró que HC-6 muestra dos comportamientos diferentes en las lineas tumorales a) a bajas concentraciones (0,5-0,8 uM) HC-6 afecta preferentemente al desarrollo del ciclo celular, provocando inhibición del mismo en la fase G2/M, sin afectar a la viabilidad celular y b) inducción de apoptosis independiente de trasncricpión cuando la dosis es mayor (5-8 uM). Esta respuesta apoptótica cursa con degradación de fragmentos oligonucleosomales y activación de caspasa-3. La capacidad de HC-6 de inducir descenso en los niveles proteicos de Bcl-2 y Bcl-XL y sobreexpresión de la proteina Bax, indican el papel fundamental que juega la mitocondria en la respuesta apoptótica producida por este compuesto. El análisis de este efecto se realizó mediante tecnología microarray y rt-pcr revelando cambios en una proporción muy pequeña de genes. Estos datos indican que HC-6 se perfila como un potente antineoplásico comportándose como citostático o proapoptótico dependiendo de la dosis empleada