The role of protein neddylation in the pathogenesis of cholangiocarcinomanew potential therapeutic target

Résumé

Las modificaciones post-traduccionales son mecanismos esenciales para la modulación de respuestas celulares a diversos estímulos. La relevancia de la NEDDilación de proteínas en particular se ha demostrado en distintas enfermedades, incluyendo el cáncer. En este estudio se investigó el papel de la NEDDilación de proteínas en el desarrollo y progresión del colangiocarcinoma (CCA). Para ello, se analizó la expresión de distintos componentes de la vía de NEDDilación (i.e., NAE1, UBA3, NEDD8) en tejido de pacientes con CCA e hígado sano adyacente al tumor, así como en líneas celulares humanas de CCA en comparación a colangiocitos humanos normales (NHC), observando que el incremento de NEDDilación parece ser un evento general en CCA. Por ello, utilizamos Pevonedistat, un inhibidor específico de NEDDilación, sobre las células de CCA, observando una consecuente disminución de la NEDDilación de proteínas, acompañada de una reducción de la proliferación y la supervivencia de dichas células. En modelos murinos subcutáneo y ortotópico de CCA humano, la administración de Pevonedistat resultó en una disminución del crecimiento tumoral. Simultáneamente, tras inmunoprecipitar las proteínas NEDDiladas en células de CCA y NHCs, realizamos un análisis proteómico para identificar aquellas proteínas diferencialmente NEDDiladas en células tumorales. Por otro lado, generamos mediante CRISPR/Cas9 células de CCA deficientes en NAE1, que presentaron una menor capacidad proliferativa in vitro y un crecimiento más lento en tumores subcutáneos in vivo. Además, el secretoma de células deficientes en NAE1 redujo la proliferación y migración de fibroblastos asociados a tumor derivados de pacientes con CCA. En conclusión, la NEDDilación de proteínas se presenta como una nueva diana terapéutica en el tratamiento del CCA y su microambiente tumoral.