Soil health assessment through in vitro assays with primary cultures of coelomocytes of eisenia fetida

Résumé

La tesis estudia técnicas nuevas para la evaluación de la contaminación del suelo con la especie centinela Eisenia fetida. Se han desarrollado nuevos biomarcadores y se ha estudiado el efecto de la biología de la lombriz en su medición, que pueden llegar a producir interpretaciones erróneas de los datos. También se ha demostrado que factores físico-químicos del suelo como la materia orgánica y el pH influyen en la biodisponibilidad de los contaminantes y en los biomarcadores por su acción como factores de estrés adicionales. Dadas las dificultades de trabajar con exposiciones in vivo para la evaluación de la toxicidad del suelo, se ha desarrollado un cultivo celular primario de células inmunitarias de la lombriz, los celomocitos, y se ha demostrado su sensibilidad ante compuestos químicos tóxicos como metales (Pb, Cd, Ni, Cu) y ante elutriados de suelos reales contaminados del País Vasco. Entre los biomarcadores más usados y más sensibles está la captación de rojo neutro (NRU) que presenta una respuesta bifásica con un descenso inicial y un incremento posterior.Con con la ayuda del análisis de citometría de flujo se ha determinado como un efecto del cambio en las subpoblaciones de celomocitos. NRU y la medición de riboflavina en cultivos, han sido implementado finalmente en la evaluación de la toxicidad de un emplazamiento del País Vasco con contaminación mixta, y han resultado ser sensibles y eficaces para la determinación de la toxicidad de suelos. En conclusión, se ha desarrollado una metodología in vitro con cultivos primarios para mejorar la reproducibilidad y acortar el tiempo de las evaluaciones de toxicidad del suelo.