Desarrollo de técnicas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico y la tipificación de salmonella spp

Résumé

Salmonella es uno de los patógenos alimentarios más importantes a nivel mundial. Actualmente el diagnóstico de Salmonella se realiza habitualmente mediante técnicas de cultivo convencional que son lentas y tediosas. Por otra parte, la técnica má sextendida para la diferenciación de los aislamientos de Salmonella es la serotipificación. Esta técnica se basa en la determinación de antígenos de superficie cuya presencia depende de la expresión de caracteres fenotípicos. Para el análisis taxonómico del género son necesarias herramientas de genotipificación que sean rápidas, económicas y que estén a disposición del mayor número posible de laboratorios. En este estudio hemos diseñado tres técnicas de PCR para el diagnóstico y la tipificación epidemiológica de Salmonella spp. En primer lugar se ha diseñado una PCR múltiple para el diangóstico de Salmonella en muestras clínicas de heces. Hemos diseñado también una técnica de tipificación binaria basada en la PCR a tiempo real para la diferenciación de genotipos dentro del género Salmonella. Por último, hemos diseñado una técnica de tipificación semejante al MLVA pero con la ventaja adicional de que al estar dirigida a lugares hipervariables del cromosoma bacteriano es más discriminativa que las técnicas hasta ahora descritas.