Desarrollos de métodos moleculares y su aplicación al estudio de la resistencia genética y patogenia molecular del scrapie

Zusammenfassung

El scrapie es una enfermedad neurodegenerativa que afecta a ovejas y cabras cuyo agente causal es una proteína llamada prión o PrPSc resultado de un cambio conformacional de una proteína de idéntica estructura primaria y codificada por el hospedador, la PrPc. Existe una disposición genética a sufrir scrapie ligada a una serie de polimorfismos del gen PrP que confieren susceptibilidad o resistencia a scrapie. Esta relación sirve para erradicar el scarpie por miedo de selección genética de animales resistentes. En el presente trabajo se han desarrollado dos métodos para la detección de estos polimorfismos (RFLP y PCR a tiempo real) que han permitido conocer el riesgo hipotético frente a scarpie en las razas autóctonas de la CAPV (Latxa y Carranzana). El análisis de una muestra representativa de estos animales ha revelado como estas razas poseen una sensibilidad genética media-alta a sufrir scarpie, sin embargo, la baja incidencia de casos positivos en las mismas hace que la selección genética en estos animales deba realizarse con cautela. También se han analizado y comparado los niveles de expresión del gen PrP con la susceptiblidad genética a scrapie con el fin de testar la hipótesis de que en los animales de mayor sensibilidad genética tuviera lugar una mayor expresión del gen PrP y con ello una mayor presencia de precursor PrPc susceptible de ser transformado en PrPSc. Previamente, se ha realizado un estudio de la estabilidad de genes endógenos en seis tejidos ovinos para poder cuantificar el mRNA por RT-PCR a tiempo real y cuantificación relativa. Se ha observado cierta tendencia a un aumento en los niveles del mRNA del gen PrP a medida que aumenta la susceptiblidad genética a scrapie. Sin embargo, las diferencias encontradas han sido marginales por lo que no se ha podido concluir que exista una relación entre la susceptibilidad genética a scarapie y los niveles de mRNA del gen PrP. Finalmente se ha realizado un análisis de los ni