El transportador abc de nitrato/nitrito de phormidium laminosum. Aspectos funcionales y estructurales de las subunidades nrta y nrtc

Résumé

El nitrato y en mucha menor medida el nitrito constituyen las principales fuentes de nitrógeno inorgánico en cianobacterias. En Phormidium laminosum el transporte de estos aniones al interior celular está mediado por un sistema multicomponente denominado transportador ABC de nitrato/nitrito, codificado por el operón de genes NRT. En este trabajo, se ha estudiado separadamente cada uno de los componentes proteicos que conforman esta permeasa periplásmica, prestando especial atención en la caracterización bioquímica de las subunidades NrtA y NrtC. Los datos experimentales demuestran que NrtA es la subunidad del transportador que une nitrato y nitrito en el espacio periplásmico. NrtA es un monómero periférico de membrana de 45 kDa capaz de unir ambos aniones con alta afinidad. Por su parte, NrtB es la subunidad encargada de la translocación del nitrato y el nitrito al interior celular. Se ha demostrado que NrtC es la subunidad citoplásmica del transportador NRT que une y posiblemente cataliza la hidrólisis de ATP, y que es el dominio N-terminal de la proteína el que está directamente involucrado en la unión de ATP. La unidad funcional de NrtC, es un dímero, siendo dependiente la unión de nucleótido a la proteína del estado de agregación de ésta. Los resultados obtenidos han revelado importantes aspectos funcionales y estructurales de los componentes del transportador que pueden contribuir al mejor entendimiento de cómo funciona el transportador ABC de nitrato/nitrito en P.laminosum.