Obtención y caracterización de antígenos de Toxocara canis que intervienen en reacciones de hipersensibilidad mediada por IgE en el hospedador definitivo y en el hombre

Résumé

Toxocara canis es un nematodo parásito de cánidos que puede infectar a un amplio rango de mamíferos incluido el hombre (Glickman y Schantz, 1981; Lewis y Maizels, 1993). La mayoría de las investigaciones sobre biología molecular de T. canis se han centrado en las proteínas excretoras-secretoras del estadio infectante L2 de este parásito (Despommier D., 2003). Desde el punto de vista inmunológico, no existen datos que nos permitan definir antígenos relevantes de Toxocara canis asociados a reacciones de hipersensibilidad mediada por IgE. De todos los antígenos identificados de Toxocara sólo el grupo de poliproteínas de nematodo de T. canis (TBA-1), descrito por Yahiro y col. (1998), ha sido caracterizado como alergénico, si bien, no presenta relevancia en los procesos de hipersensibilidad mediada por IgE. Dentro de las proteínas de excreción-secreción de las larvas L2 de T. canis, la proteína TES-32 es la más abundantemente secretada y la más estudiada tanto a nivel molecular como bioquímico, pero hasta el momento no se ha determinado su capacidad como proteína fijadora de IgE Además, debido a la creciente asociación entre urticaria y Toxocara (Gavignet y col., 2008) sería de interés la evaluación de los alergenos de T. canis implicados en enfermedades alérgicas como la urticaria crónica. Por los antecedentes expuestos anteriormente, el objetivo de esta tesis doctoral es identificar las proteínas fijadoras de IgE humana (alergenos) relevantes en una población sensibilizada a Toxocara, y en base a ello, obtener el gen que codifica para la proteína más abundantemente secretada, TES-32. En este estudio se ha demostrado que el hospedador definitivo presenta una respuesta inmunológica humoral IgE, detectándose 7 nuevos componentes alergénicos mediante electroforesis monodimensional y dos nuevos alergenos de Toxocara canis capaces de fijar IgE canina, correspondientes con la lectina tipo C TES-32 y la lectina tipo C Tc-ctl-4 ó TES-70, mediante electroforesis bidimensional. Además este estudio se han identificado 8 alergenos capaces de fijar IgE humana (25, 27, 32, 35, 40, 45, 75 y 100 kDa) mediante electroforesis monodimensional. Dentro de estos alergenos, destaca la proteína de 35 kDa que fue reconocida por el 90% de los sueros y por ser el antígeno de diagnóstico principal en la toxocariosis humana La caracterización de alergenos del E-SL2 de T. canis mediante electroforesis bidimensional, ha permitido identificar 13 isoformas alergénicas; 10 isoformas se corresponden con la lectina tipo C TES-32 y 3 isoformas con la lectinas tipo C Tc-CTL-4 o TES-70. La proteína TES-32 puede ser considerada como alérgeno mayor de Toxocara canis. En cuanto a la evaluación de los alergenos de T. canis en una población de pacientes diagnosticados de urticaria de origen desconocido, existe una probabilidad del 89% de que los pacientes con urticaria presenten inmunoglobulinas IgE frente a Toxocara canis La identificación de un panel de alergenos de T. canis no descritos hasta este trabajo, pone de manifiesto la necesidad futura de un estudio más pormenorizado en el campo de la alergia asociada a Toxocara canis