Sulphated peptides as heparin mimics designed for FGF respetors

Résumé

Este trabajo de tesis doctoral describe el diseño de nuevos mímicos de heparina, péptidos sulfatados, haciendo uso de la química combinatoria en fase sólida como principal herramienta para generar miles de compuestos de forma rápida y sencilla. En primer lugar se desarrolló un método de síntesis y análisis para generar péptidos sulfatados en fase sólida, que posteriormente se utilizó junto con la química combinatoria para la construcción de peptidotecas. Para la selección de posibles mímicos de heparina de entre los miles de compuestos que constituyen estas bibliotecas de péptidos sulfatados, se llevó a cabo el diseño de un ensayo biológico en fase sólida. En este ensayo de la proteína FGF-1 (proteína con alta afinidad por la heparina) marcada con una partícula fluorescente se unía a la partícula sólida portadora del posible mímico de heparina. Posteriormente, las partículas sólidas fluorescentes se aislaban, y se analziaban por degradación de Edman, para identificar el péptido que portaban. Una vez seleccionados e identificados los péptidos sulfatados en fase sólida se realizaron estudios en disolución para cuantificar así su afinidad por la proteínas FGF-1. Los resultados obtenidos en estos estudios nos confirmaron que los péptidos sulfatados se unen a la proteína FGF-1 y además inhiben su unión a ciertos oligosacáridos de heparina. En conclusión este trabajo ha abierto un amplio rango de posibilidades en el desarrollo de nuevos mímicos sintéticos de la heparina de manera rápida y eficaz.